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目的基因克隆的三大法宝:PCR技巧详解 在分子生物学研究中,目的基因的克隆是实验成功的关键。 然而,目的基因的扩增常常是一个挑战,尤其是当需要在UTR区设计引物时,因为这些区域可能包含大量的重复序列,使得PCR扩增变得困难重重。 降落PCR:精准调试的艺术 降落PCR是一种巧妙的PCR技术,它允许在PCR扩增过程中逐步降低退火温度,从而在多个温度点尝试引物与模板DNA的结合。这种方法可以制造出初步的PCR产物,然后在固定的退火温度下进行第二轮扩增,从而提高扩增成功率。劊 巢式PCR:特异性扩增的保证 巢式PCR以其高特异性著称。它需要在UTR区设计两对引物,首先进行第一轮扩增获得PCR产物,然后将其稀释后进行第二轮扩增。这种方法的关键在于第一轮产物的稀释,即使琼脂糖胶上看不到条带,也可能存在微量的PCR产物,因此大胆进行第二轮PCR扩增是成功的关键。 ️ 半巢式PCR:灵活性与效率的结合 半巢式PCR结合了巢式PCR和降落PCR的优点,它允许在UTR区设计第一对引物进行初步扩增,然后在CDS区选定引物进行第二轮扩增。这种方法不仅提供了更大的引物设计空间,还能对长片段进行拆分扩增,最终通过多片段重组将目的基因连接到载体上。 通过以上三种PCR方法,我们可以更有效地克隆目的基因。 在实际操作中,选择合适的方法至关重要,因为不同的基因和实验条件可能需要不同的策略。记住,没有克隆不出来的基因,只有不合适的方法。
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新华为手机到手,这些操作你一定要知道!𑊤𐦉机,以下几个步骤可千万不能忘记哦! 1⃣ 如何判断手机是否为新机? 查询手机激活状态:可以通过华为消费者业务服务官网的“保修期及权益查询”功能,输入设备序列号来查看手机的激活状态。设备序列号可以在包装盒条形码下方找到,或者在设备拨号功能界面输入“*#06#”后查看。 检查手机外观:拆开包装盒后,仔细查看手机的屏幕、边框、后盖是否有瑕疵,前后摄像头是否有进液、灰尘等问题。 2⃣ 新手机第一次充电,需要把电量用完再充吗? 不需要!目前手机采用的电池均为锂电池,并没有记忆效应,无需进行充放电激活操作。只需在充电时使用官方标配充电器,随用随充即可。 3⃣ 购入新机后,如何快速导入旧手机数据? 可以使用华为手机的“手机克隆”功能,轻松完成旧手机数据迁移。具体步骤如下: 打开手机克隆功能,选择这是新设备。 选择旧设备类型为HarmonyOS、Android或iOS。 按照提示操作,即可将联系人、照片、日程等数据迁移到新设备。 4⃣ 新手机需要开启“华为云空间”吗? 建议开启!华为云空间可以实现数据自动备份、常用数据多终端同步、远程查找手机等多项功能,从而为您更安全、便捷地管理数据。具体操作如下: 打开设置,点击华为帐号,选择云空间。 在云备份中选择设备,点击备份选项选择需要备份的数据,点击立即备份,即可保存至云空间。 5⃣ 如何查询新机权益? 可以通过以下两种路径查询: 通过华为终端客户服务微信小程序或我的华为App,在服务页面中找到快捷服务,找到权益查询,点击查询即可。 拨打华为消费者服务热线950800咨询相关权益,7*24小时专业客服为您在线解答。 赶紧学起来吧!耀
逃离2022:数字化生存的梦境与现实 蠥芨in Arcade的装置展《逃离矩阵》中,多种后现代生存体验被巧妙地融合在一起。这些体验包括对自身存在真实性的怀疑、媒介高速迭代带来的不安感,以及信仰战争与意识形态游戏的荒谬性。这些体验以模糊而清晰的梦境形式呈现,仿佛在邀请观众逃离相对安全的数字化生存,进入一种集体无意识的恐惧之中。 展览门票设计成房间门牌和空心胶囊的形式,直接指向了困扰后人类的几个核心问题。元宇宙概念彻底改变了人与传统空间的关系,将人的存在抛掷到了一个更加虚无的代码矩阵中。拥有一间自己的房间,是否还关乎存在本真性和独立性?这个问题在展览中得到了深刻的探讨。 此外,基因工程与人工智能技术也带来了新的伦理难题。克隆器官和机器身体的出现,使得疗救与剥削、祈祷与屠戮等悖反现象变得尤为突出。当物理栖息之所被抽空后,精神的废墟几乎成为了不可避免的现实。 展览中的数字展品和实物装置共同构成了一个充满思考和探索的空间,邀请观众一同进入这个充满挑战的梦境世界。
万万没想到,中国最失败的十六大建筑: 1.广州塔,俗称“小蛮腰”,虽然外观独特,但功能性与实用性不足,成为了一座华而不实的城市地标。 2. 北京的央视大楼,其扭曲的造型被戏称为“大裤衩”,设计上的大胆并未赢得所有人的青睐,反而引发了实用性的质疑。 3. 上海的东方明珠塔,虽然成为了城市的象征,但其内部的观光体验与预期相差甚远,让不少游客感到失望。 4. 深圳的华润大厦,被誉为“春笋”,但其过于密集的办公空间,让人感到压抑,实用性打了折扣。 5. 南京的紫峰大厦,高耸入云,却因设计上的缺陷,导致部分空间难以利用,成为建筑界的遗憾。 6. 重庆的来福士广场,其“帆船”造型引人注目,但与周边环境的融合度低,显得突兀而不协调。 7. 成都的国际金融中心,外观华丽,却因内部动线设计不合理,给使用者带来了不便。 8. 杭州的奥体中心,庞大的规模令人震撼,但赛后利用的问题,使其成为争议的焦点。 9. 天津的金融街,高楼林立,却因缺乏人性化的公共空间,显得冷漠而缺乏活力。 10. 武汉的绿地中心,一度因资金问题停工,成为烂尾楼的代表,令人叹息。 11. 香港的环球贸易广场,虽然高度令人瞩目,但内部空间利用率低,商业价值未能完全发挥。 12. 澳门的威尼斯人酒店,虽复制了意大利风情,却因缺乏原创性,被批为文化克隆。 13. 台北的101大楼,曾经的亚洲最高,却因地震安全问题,让人对其安全性产生担忧。 14. 西安的大唐不夜城,虽然重现了盛唐风貌,但因过度商业化,失去了文化底蕴。 15. 苏州的中信泰富大厦,模仿了帆船造型,却因设计上的不成熟,显得不伦不类。 16. 青岛的海天中心,其独特的造型引人注目,但高昂的维护成本,让其成为经济负担。 这些建筑,或因设计失误,或因功能缺陷,成为了中国建筑史上的一大败笔。它们的存在,提醒着我们,建筑不仅仅是外观的展示,更是实用性与人性化的结合。
基于大数据技术的游憩型绿道选线研究 在信息时代的背景下,多元数据资源的开放为城市人居环境建设提供了新的机遇,大数据影响着每个人的生活和认知,也反应着当下人们的情感喜好和使用需求。 而随着城市的发展,绿道体系的规划建设也更加关注城市居民的游憩需求,构建系统性的游憩型绿道选线方法是当前绿道体系建设的重要环节。 然而当前我国绿道选线还多使用较为传统的方法体系,为更贴合居民游憩需求的偏好,本文深度结合大数据技术和游憩型绿道选线方法,为绿道建设提出新的可能性。 绿道的发展建设在早期主要集中于美国等欧美发达国家,最早起源于Fⷌⷥ奥熦柳𗥜豹世纪60年代对波士顿城市公园建设中的提出的“Parkway”公园路的概念。 纵观历史,国外对于绿道建设的发展历程大致可以发展为四个历史阶段。 19世纪,美国工业革命背景下,城市土地被大量占用,城市内环境拥挤,公共空间严重缺乏,大量的中产阶级和暴发户迁往郊区居住。 奥姆斯特德意识到城市正在不断向郊区无限延伸,而城市内部的环境永远无法得以缓解。 奥姆斯特德对当时的情况深度思考,回答了“乡村以什么样的形式与城市结合”问题。 1858年,奥姆斯特德在法国巴黎林荫大道的启发中,将公园路的概念逐步发展为公园道。 从此,他以公园道为概念建设了布鲁克林景观公园路规划、伯克利大学分校校园的公园路规 划以及最为著名的波士顿“翡翠项链”公园。 其中,波士顿“翡翠项链”是早期西方国家绿地建设的典型案例。 奥姆斯特德在美国波士顿地区利用道路和绿色空间将佛莱克林公园、阿诺德植物园、牙买加公园等九大公园进行串联,形成完整的公园系统。 之后,奥姆斯特德的学生查尔斯ⷨ姉𖤼𘤺奥姆斯特德的理念,在波斯顿利用河流和沿海空间设计公园道,将5条沿海河流相连接,最终形成了600km2的公园系统。 1898年,英国的霍华德提出“田园城市”,其主要针对工业革命后城市内部环境问题作出了系统的规划和理论研究,梳理了城市和乡村的关系,提出了和乡村结合的理想城市模型。 同时,在《明天:通往真正改革的和平之路》书中提出绿带(Greenbelt)的概念,利用绿带来限制城市的无限扩张。 第一阶段绿道的建设还处于雏形,人们逐渐意识到需要通过某种手段遏制城市的肆意扩张,但还没有系统的概念和建设规范,奥姆斯特德作为领头人物。 将他的思想应用于城市,逐步开始启发其他设计师,为下一阶段的发展有着重要的启蒙作用。 在奥姆斯特德的启发下,涌现了一大波景观设计师对于绿道规划建设的探索。 1903年,OlmstedBrothers在波特兰市做的广场规划中完成了长64.37km的公园系统——“40km环线”。 HenryWright综合森林生态系统和河流廊道等因素对纽约进行综合性规划。 美国国家公园城市管理局(NPS)也进行了大量的公园道实践探索,其中蓝岭公园道规划了长约750km的公园道,使其成为美国主要游憩路径之一。 20世纪20年代,本顿ⷩῥ华德的“绿带理论”延伸,融合了部分奥姆斯特德“公园道”的思想。 提出将城市与乡村结合的步行环线,同时还提出了以游览为主要功能的绿道系统,极具前瞻性。 1921年,本顿ⷩῦ出阿巴拉契亚小径,其位于蓝岭公园道旁,一共连接7个国家公园,30多个州级公园和地方公园,形成一个较完整的系统。 但由于理论的超前性最终没有完全实现其规划蓝图。 阿巴拉契亚小径是美国最早的游径,他证实了本顿ⷩῧ主要思想:自然与人文关怀,在尊重大自然原始肌理的情况下增加环线的游憩功能。 同时,保护美国东海岸生态,遏制城市的无限扩张。 1928年,查尔斯?艾略特二世建设了麻省长达250km的“环湾规划”,连接了波士顿大都市区内重要的湿地和排水系统,连接并保护了州内的社区和生态系统。 1933年,恩温在英国伦敦规划了总面积达200平方公里的绿带。 20世纪30年代,英国颁布“绿带法案”推动了绿带的实际建设。 1945年,帕特里克ⷩ🦳⥅隆比规划了总面积月2000平方公里的绿带,同时提出“绿带”规划的三个目的,控制城区规模,控制城市开发边界,为市民提供休憩空间。 绿带政策的主要目的为:通过立法与政策指引保证绿的本质型特征——永久开敞性,以控制城市建成区无序蔓延。 限制城市开发的尺度,防止城镇摊大饼式发展与合并,保护乡村土地不受建成区的入侵,提升城市环境品质以及促进城市可持续性更新与发展。
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